熒光蛋白觀(guān)測(cè)燈是用來(lái)快速觀(guān)察篩選目標(biāo)基因表達(dá)的工具，熒光蛋白激發(fā)觀(guān)測(cè)燈能夠觀(guān)察綠色熒光蛋白、藍(lán)色熒光蛋白、黃色熒光蛋白、紅色熒光蛋白等多種熒光蛋白的表達(dá)。面對(duì)多種熒光蛋白該如何快速選擇理想的熒光蛋白激發(fā)觀(guān)測(cè)燈?
R和L波段:
R波段為450nm，L波段為488nm，這2給波段主要用于觀(guān)察綠色熒光蛋白。綠色熒光蛋白(Green fluorescent protein，簡(jiǎn)稱(chēng)GFP)應(yīng)該在450nm、365nm、488nm里面選一種，因綠色熒光蛋白有近百種，盡管都是綠色熒光蛋白，但激發(fā)波長(zhǎng)從320nm到500nm都有，在選擇激發(fā)觀(guān)測(cè)燈時(shí)，一定要搞清楚具體是哪種綠色熒光蛋白，這種熒光蛋白的激發(fā)主峰在什么波段，有了激發(fā)光譜圖，選擇靠近主峰的波段，就是理想的激發(fā)波長(zhǎng)。
如果是增強(qiáng)型綠色熒光蛋白，選擇450nm或488nm是理想的。那么選擇LUYOR-3415熒光蛋白激發(fā)觀(guān)測(cè)燈的R波段，如果是野生型GFP(Wild-type GFP，wtGFP)，建議選擇365nm波段
C波段:
C波段為505nm，主要是用于激發(fā)黃色熒光蛋白(Yellow Fluorescent Protein ，YFP)基因的表達(dá)。黃色熒光蛋白主要有Citrine, Venus, and Ypet。如果您的載體里面的標(biāo)記基因用的是Citrine, Venus, and Ypet，那么就選擇C波段。
G波段:
G波段為530nm波段，用來(lái)激發(fā)和觀(guān)察紅色熒光蛋白(Red fluorescent protein,簡(jiǎn)稱(chēng)RFP) 的表達(dá)。紅色熒光蛋白常用的有DsRed2，mCherry、mRuby2，tdTomato。
V波段:
V波段:為405nm波段，是用來(lái)觀(guān)察青色熒光蛋白(Cyan Fluorescent Protein簡(jiǎn)稱(chēng)CFP)的表達(dá)，青色熒光蛋白激發(fā)波長(zhǎng)為405nm，發(fā)射波長(zhǎng)為485nm，如果您是用的CFP，那么選擇V波段.
U波段:
U波段:為365nm波段，是用來(lái)觀(guān)察藍(lán)色熒光蛋白(blue Fluorescent Protein簡(jiǎn)稱(chēng)BFP)的表達(dá)和 野生型GFP(Wild-type GFP，wtGFP)，推薦使用便攜式高強(qiáng)度紫外線(xiàn)燈。
